Sadržaj
Fluorescencija in situ hibridizacija (FISH) jedna je od nekoliko tehnika koje se koriste za pretragu DNK vaših stanica, tražeći prisutnost ili odsutnost specifičnih gena ili dijelova gena.Mnogo različitih vrsta karcinoma povezano je s poznatim genetskim abnormalnostima. I genetski, ne govorimo samo o nasljedstvu. Tijekom života stanice mogu pogriješiti kad se dijele i rastu. Mutacije u DNK koje su povezane s rakom mogu se akumulirati u tim stanicama.
Kako radi
FISH je tehnika koja koristi fluorescentne sonde za otkrivanje određenih gena ili dijelova gena (DNA sekvence). Osoblje laboratorija medicinskog centra i onkolozi koriste FISH kako bi pomogli u procjeni pacijenata koji mogu imati rak, a ponekad i za praćenje pacijenta kojem je već dijagnosticiran rak i liječen je.
FISH se može obaviti pomoću različitih vrsta uzoraka prema mjestu i vrsti sumnje na rak: Tumorske stanice dobivene iz periferne krvi, biopsije koštane srži ili biopsije limfnih čvorova i tkivo ugrađeno u parafin (to se odnosi na uzorak tkiva koji se obrađuje u laboratoriju i ugrađuje u vrstu voska, čineći ga krutijim, tako da se može narezati na tanke dijelove i montirati za gledanje pod mikroskopom).
Što znače slova
"H" u FISH-u odnosi se na hibridizaciju. U molekularnoj hibridizaciji, označena sekvenca DNA ili RNA koristi se kao sonda za vizualizaciju crvene Lego cigle, ako želite. Sonda se koristi za pronalazak odgovarajuće Lego cigle ili DNA sekvence u biološkom uzorku.
DNA u vašem uzorku je poput hrpe Lego kockica, a većina cigli u tim hrpama neće se podudarati s našom crvenom sondom. I sve su vaše cigle lijepo organizirane u 23 para hrpa cigli - svaka hrpa je jedan ili više vaših uparenih homoloških kromosoma. Za razliku od Lego kockica, naša crvena Lego sonda je poput snažnog magneta i pronalazi svoj spoj bez potrebe za razvrstavanjem hrpa.
"F" se odnosi na fluorescenciju. Naša bi se crvena sonda mogla izgubiti u hrpama cigli, pa je označena obojenom fluorescentnom bojom tako da će svijetliti. Kad pronađe svoj spoj među 23 uparene hrpe, fluorescentna pločica otkriva svoje mjesto. Dakle, sada možete vidjeti kako istraživači i kliničari mogu koristiti FISH kako bi identificirali gdje se (koja hrpa ili koji kromosom) nalazi određeni gen za pojedinu osobu.
Oznake „I“ i „S“ znače in situ. To se odnosi na činjenicu da naša crvena Lego kocka traži svoj spoj unutar uzorka koji ste dali.
RIBE i specifični karcinomi krvi
RIBE i ostalo in situ postupci hibridizacije koriste se za dijagnozu različitih kromosomskih abnormalnosti-promjena u genetskom materijalu, promjena u kromosomima, uključujući sljedeće:
- Delecija: dio kromosoma je nestao
- Translokacija: dio jednog kromosoma se prekida i lijepi na drugi kromosom
- Inverzija: dio kromosoma se prekida i vraća natrag, ali obrnutim redoslijedom
- Umnožavanje: dio kromosoma prisutan je u previše kopija unutar stanice
Svaka vrsta raka može imati svoj vlastiti skup kromosomskih promjena i relevantne sonde. FISH ne samo da pomaže identificirati početne genetske promjene u procesu bolesti poput raka, već se također može koristiti za praćenje odgovora na terapiju i remisiju bolesti.
Genetske promjene koje je otkrio FISH ponekad nude dodatne informacije o tome kako će se vjerojatno ponašati rak pojedinca, na temelju onoga što je u prošlosti primijećeno kod ljudi s istom vrstom raka i sličnim genetskim promjenama. Ponekad se FISH koristi nakon što je dijagnoza već postavljena kako bi se prikupile dodatne informacije koje bi mogle pomoći u predviđanju ishoda ili najboljeg liječenja pacijenta.
FISH može prepoznati kromosomske abnormalnosti u leukemijama, uključujući kroničnu limfocitnu leukemiju (CLL). Za kroničnu limfocitnu leukemiju / mali limfocitni limfom, FISH omogućuje pacijentima da saznaju svoju prognostičku kategoriju: dobra, srednja ili loša. U akutnoj limfoblastičnoj leukemiji (ALL), genetika leukemijskih stanica može vam reći o razini rizika od raka i pomoći u vođenju terapijskih odluka.
Dostupni su i FISH paneli za limfome, multipli mijelom, proliferativne poremećaje plazma stanica i mijelodisplastični sindrom. U slučaju limfoma plaštnih stanica, na primjer, postoji translokacija da FISH može otkriti GH / CCND1 t (11; 14) koji je često povezan s ovim limfomom.
Zašto RIBA?
Prednost FISH-a je što se ne mora izvoditi na stanicama koje se aktivno dijele. Citogenetsko ispitivanje obično traje oko tri tjedna, jer stanice raka moraju rasti u laboratorijskim posudama otprilike 2 tjedna prije nego što se mogu testirati. Suprotno tome, rezultati FISH-a obično su dostupni iz laboratorija u roku od nekoliko dana.